各種細菌所具有的酶系統(tǒng)不盡相同，對營養(yǎng)基質(zhì)的分解能力也不一樣，因而代謝產(chǎn)物存在差別。以此用生理生化試驗的方法檢測細菌對各種基質(zhì)的代謝作用及其代謝產(chǎn)物，從而鑒別細菌的種屬，稱之為細菌的生理生化反應(yīng)，締一生物為您介紹幾種細菌鑒定中常見的生理生化反應(yīng)原理：

糖（醇）類發(fā)酵試驗

不同的細菌含有發(fā)酵不同的糖（醇）的酶，因而發(fā)酵糖（醇）的能力各不相同，產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物也不同：有的產(chǎn)酸產(chǎn)氣，有的產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。指示劑溴甲酚紫，pH5.2黃色—pH6.8紫色，當發(fā)酵產(chǎn)酸時，培養(yǎng)基將由紫變黃。產(chǎn)氣可由杜氏小管中有無氣泡來證明。

甲基紅試驗（M.R試驗）

甲基紅試驗，pH4.4紅色～pH6.2黃色，是用來檢測由葡萄糖產(chǎn)生的有機酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。有些細菌分解糖類產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸進一步反應(yīng)形成甲酸、乙酸、乳酸等，使培養(yǎng)基的pH降低到4.2以下。有些細菌在培養(yǎng)的早期產(chǎn)生有機酸，但在后期將有有機酸轉(zhuǎn)化為非酸性末端產(chǎn)物，如乙醇、丙酮酸等，使pH升至大約6。

Voges-Proskauer試驗（伏-普試驗，V.P.試驗）

伏-普試驗是用來測定某些細菌利用葡萄糖產(chǎn)生非酸性或中性末端產(chǎn)物的能力。某些細菌分解葡萄糖成丙酮酸，再將丙酮酸縮合脫羧成乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在堿性條件下，被氧化為二乙酰，二乙酰與培養(yǎng)基中所含的胍基作用，生成紅色化合物為V.P.反應(yīng)陽性。

4.靛基質(zhì)試驗

某些細菌，如大腸桿菌，能產(chǎn)生色氨酸酶，分解蛋白胨中的色氨酸，產(chǎn)生靛基質(zhì)，靛基質(zhì)與對二甲基氨基苯甲酸結(jié)合，形成玫瑰色靛基質(zhì)。

硫化氫試驗

某些細菌能分解含硫的氨基酸，產(chǎn)生硫化氫，硫化氫與培養(yǎng)基中的鐵鹽反應(yīng)，形成黑色的硫化鐵沉淀，為硫化氫試驗陽性。

6.明膠液化實驗

明膠在25度以下可維持凝膠狀態(tài)，以固體狀態(tài)存在，而在25度以上時明膠就會液化。有些微生物可產(chǎn)生一種成為明膠酶的胞外酶，水解這種蛋白質(zhì)，而使明膠液化，甚至在4度仍能保持液化狀態(tài)。

檸檬酸鹽利用試驗

有的細菌如產(chǎn)氣桿菌，能利用檸檬酸鈉為碳源，因此能在檸檬酸鹽培養(yǎng)基上生長，并分解檸檬酸鹽后產(chǎn)生碳酸鹽，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性。此時培養(yǎng)基中的溴麝香草酚藍指示劑pH6.0(黃)～7.6(藍)，由綠色變?yōu)樯钏{色。

淀粉水解實驗

細菌水解淀粉的過程可以通過底物的變化來證明，即用碘測定不再產(chǎn)生藍色。

細菌的生理生化試驗，是菌種鑒定的關(guān)鍵性試驗，但傳統(tǒng)試驗方法存在耗時耗力，時間過程較長；需要試劑、耗材、儀器較多等缺點。上 HiMedia公司（微生物公司）生產(chǎn)的HiBio-ID™微生物生化鑒定試劑卡（盒），較好的解決了這一問題。

以上所提到的實驗，均可采取試劑盒的檢測方法，HiBio-ID™微生物生化鑒定試劑卡（盒），一個生化鑒定卡上集成了12種或24種生化試驗，無需借助其他儀器，可一次性出結(jié)果，鑒定卡的選擇依賴于各種因素，如在選擇性鑒別瓊脂上的生長狀況、生長時間、菌落特征、革蘭氏染色等。

HiBio-ID™微生物生化鑒定試劑卡（盒）試劑盒目前有20多種，能檢測葡萄球菌、芽孢桿菌、沙門氏菌、腸桿菌、乳桿菌等多種菌種。

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