大腸桿菌顯色培養(yǎng)基的原理

　　結(jié)合了顯色原和熒光基團(tuán)，檢測β-葡萄糖醛酸酶的存在

　　大腸桿菌-藍(lán)至綠色，陽性β-葡萄糖醛酸酶和陽性熒光

　　其他大腸菌群-無色，陰性β-葡萄糖醛酸酶和陰性熒光

　　膽鹽混合物增加選擇性-革蘭氏陽性菌被抑制

　　操作步驟：

　　1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液

　　2、取樣品液1ml加入冷卻至45-50℃顯色培養(yǎng)基中混勻或涂布于平板上

　　3、36±1℃培養(yǎng)18～24h，選用有30～200個菌落的平板，計數(shù)平板上出現(xiàn)的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色，其它細(xì)菌為無色或黃色菌落。

　　總大腸桿菌=藍(lán)綠色菌落

　　4、對可疑大腸桿菌菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)12-16小時，挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗

　　大腸桿菌顯色培養(yǎng)基操作注意事項

　　1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。

　　2、組織固定起著非常重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時間。

　　3、經(jīng)典三色染色中，常要求使用試劑（A）染核，也可用蘇木精染核，但蘇木精染核后切片顏色不夠鮮艷，因為染色目的主要在于區(qū)分膠原纖維和肌纖維，一般也可以省略該染色步驟。

　　4、試劑（B）的分化時間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定，。

　　5、試劑（E）為0.2%乙酸水溶液，可使色彩更清晰鮮艷，如果使用量大可自行配制。

　　6、用試劑（F）分化要在鏡下控制，分化到膠原纖維呈淡紅色；纖維呈紅色即可。分化時間根據(jù)染色深淺而定，一般1～2min。

　　7、返藍(lán)液常使用氨水水溶液，亦可自行配制Scoot促藍(lán)液或0.1～1%碳酸鋰水溶液，該產(chǎn)品森貝伽有售。

　　8、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

　　9、使用場所應(yīng)通風(fēng)，并遠(yuǎn)離火源。

　　以上便是今天關(guān)于大腸桿菌顯色培養(yǎng)基在實驗過程中要怎么操作及注意些什么的全部分享了，希望對大家今后使用本設(shè)備能有幫助。