前文提到，PCR實驗室可分為試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴增區(qū)和產(chǎn)物檢測區(qū)四個區(qū)域，這四個區(qū)域在物理空間上必須*相互獨立，各區(qū)域無論是在空間上還是在使用中，應(yīng)當(dāng)始終處于*的分隔狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。

所以，臨床基因擴增檢驗實驗室的空氣流向應(yīng)按：試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴增區(qū)→產(chǎn)物檢測區(qū)，應(yīng)時刻防止擴增產(chǎn)物順空氣氣流進入擴增前區(qū)域?？砂凑丈鲜鲰樞騾^(qū)域空氣壓力遞減的方式進行，也可通過安裝排風(fēng)扇、負(fù)壓排風(fēng)裝置或其他可行方式實現(xiàn)。

臨床基因擴增檢驗實驗室的環(huán)境清潔：《臨床基因擴增實驗室工作規(guī)范》中有對物表清潔、消毒的要求，不同的實驗區(qū)域應(yīng)當(dāng)有其各自的清潔用具以防止交叉污染。

基本原則：由清潔區(qū)向污染區(qū)進行，潔具不可交叉。

清潔消毒方向：準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴增區(qū)→產(chǎn)物檢測區(qū)

清潔消毒范圍：工作區(qū)域的物體表面(含桌、椅)，可使用含氯消毒劑擦拭消毒，空氣和工作臺面可使用紫外線照射消毒，也可使用空間消毒器進行全環(huán)節(jié)消毒。

不可使用紫外線消毒器及化學(xué)消毒進行有人狀態(tài)下的消毒。

PCR室內(nèi)的消毒應(yīng)防止揚塵（減少人員走動）、殺滅DNA或RNA的基因片段?？蛇x擇懸掛紫外線燈管進行空氣消毒，試驗前照射30-60分鐘，實驗結(jié)束照射30-60分鐘，必要時延長照射時間（可照射一夜）。

終末消毒：當(dāng)出現(xiàn)實驗室污染時，應(yīng)按要求立即撤出相關(guān)人員，在無人情況下可使用化學(xué)消毒劑進行終末消毒，如熏蒸法：過氧乙酸1g/ m⊃3;加熱熏蒸（濕度70-90%），密閉24小時；氣溶膠噴霧：3%過氧化氫：20mL/m⊃3;氣溶膠噴霧；5%過氧乙酸2.5mL/m⊃3;氣溶膠噴霧（濕度20-40%）。

處理細(xì)胞培養(yǎng)工作區(qū)域的支原體

這里的工作區(qū)域包括實驗臺、超凈臺、培養(yǎng)箱（水槽除外）、液氮罐、移液器、門把手等細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境。

使用德國MB公司生產(chǎn)的支原體祛除噴霧或濕巾（品名：Mycoplasma-off™），可在5-10分鐘清除支原體，高效快速，操作方便。

產(chǎn)品特點及原理：

1）快速有效

噴霧劑和濕巾中含有支原體專用殺除劑Mynox®，可在幾分鐘內(nèi)迅速殺除支原體。

與傳統(tǒng)的化學(xué)試劑熏蒸方法相比，更加安全；與傳統(tǒng)酒精處理、紫外線照射方法相比更有效！

2）廣譜抗菌

不僅能去除支原體，而且能有效祛除葡萄球菌、腸球菌、大腸桿菌、奇異變形桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、牛腹瀉病毒、腺病毒、多瘤病毒、諾如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。

3）無腐蝕性和致癌性

乙醇作為溶劑，無腐蝕性和致癌性成分。

4）操作簡便

即用型消毒液，可以快速簡單地保持工作區(qū)的清潔干凈。

使用方法及步驟：

 

噴霧劑:

注：對于細(xì)胞培養(yǎng)箱，內(nèi)部噴灑支原體祛除噴霧或用濕巾擦拭后，應(yīng)打開箱門通風(fēng)至少1小時。如培養(yǎng)箱帶熱滅活功能，可開啟該功能以替代風(fēng)干。

 

濕巾:

對于移液器，門把手，電子設(shè)備等，可使用支原體祛除濕巾。擦拭后，應(yīng)讓其被消毒物體的表面保持濕潤，再讓其自然風(fēng)干。

培養(yǎng)箱水槽和水浴鍋中預(yù)防支原體污染的方法

細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中，培養(yǎng)箱水槽、水浴鍋經(jīng)常會有支原體以及各種細(xì)菌、霉菌滋生，稍有不慎或清洗不及時，水槽中的水源即會成為細(xì)胞污染的重要來源。

保持水槽的潔凈，對細(xì)胞培養(yǎng)的順利進行非常重要。

推薦眾多實驗室日常都在使用德國MB公司生產(chǎn)的Water Shield支原體污染防護劑（水槽用）。Water Shield可持續(xù)作用四周，使水源避免受到支原體、細(xì)菌、酵母、霉菌和孢子的污染。

 

產(chǎn)品特點：

1）長效。Water Shield含表面活性劑、季銨鹽和絡(luò)合劑，不易揮發(fā)，可持續(xù)作用4周。

2）安全。不含醛類或疊氮化物，對細(xì)胞無毒害。

3）廣譜。預(yù)防支原體、細(xì)菌、酵母菌、霉菌和孢子污染。

4）方便。Water Shield按1:200比例，直接加入水中，使用方便。

5）不產(chǎn)生水垢。

操作步驟：

1）Water Shield和蒸餾水可直接加入培養(yǎng)箱水槽或水浴鍋中。

2）Water Shield按1:200比例使用，例如：1000ml蒸餾水+5ml Water Shield，或10L蒸餾水+50ml Water Shield。

3）4周左右清洗水槽，換水，重新加入Water Shield。

 

注意事項：

避免吸入。眼睛接觸或長時間皮膚接觸可能會產(chǎn)生刺激性。因而，使用試劑時應(yīng)戴上護目鏡和一次性手套。一旦皮膚接觸，應(yīng)用大量水沖洗。

Water Shield對玻璃、陶瓷、塑料、橡膠、鋼制品、貴金屬和其他金屬安全性良好。