原代細(xì)胞培養(yǎng)

《Cell Stem Cell》

Efficient expansion and CRISPR-Cas9-mediated gene correction of patient-derived hepatocytes for treatment of inherited liver diseases

研究?jī)?nèi)容：

在實(shí)體器官，特別是肝臟中進(jìn)行基于細(xì)胞的體外基因治療，在技術(shù)上具有挑戰(zhàn)性。科研人員報(bào)告了肝細(xì)胞治療臨床應(yīng)用的可行策略。先通過(guò)大規(guī)模擴(kuò)增患者源性肝細(xì)胞獲得了高質(zhì)量的自體肝細(xì)胞。此外，增殖的患者源性肝細(xì)胞與通過(guò)篩選鑒定的AAV2.7m8變體一起，有效地實(shí)現(xiàn)了crispr - cas9介導(dǎo)的靶向整合，實(shí)現(xiàn)了FAH或OTC致病性突變的功能糾正。重要的是，這些經(jīng)過(guò)編輯的肝細(xì)胞以高水平重新填充受傷小鼠的肝臟并經(jīng)歷成熟，成功地治療了移植后酪氨酸血癥小鼠。該研究結(jié)合了患者來(lái)源的可移植肝細(xì)胞的體外大規(guī)模細(xì)胞擴(kuò)增和基因編輯，具有治療人類肝臟疾病的潛力。

其中，對(duì)分離得到的原代人肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)，用到了Ausbian胎牛血清。

其他組織細(xì)胞

《Cell Stem Cell》

Preclinical efficacy and safety of encapsulated proliferating human hepatocyte organoids in treating liver failure

研究?jī)?nèi)容：

藻酸鹽包封肝細(xì)胞移植是治療肝衰竭的一種很有前途的策略。然而，由于缺乏原代人肝細(xì)胞和難以控制其質(zhì)量，其臨床應(yīng)用受到阻礙。該科研小組之前報(bào)道了增殖的人肝細(xì)胞(ProliHHs)。該項(xiàng)研究中，質(zhì)量控制的ProliHHs被大量生產(chǎn)，并被改造成肝類器官，以提高它們的成熟度。將包封的ProliHHs肝類器官(eLO)腹腔內(nèi)移植治療肝衰竭動(dòng)物。值得注意的是，eLO治療增加了肝切除術(shù)后肝衰竭(PHLF)小鼠的存活率，并通過(guò)提供肝功能改善高氨血癥和低血糖。此外，eLO治療可以保護(hù)腸道免受phlf增強(qiáng)的滲透性，并使血清內(nèi)毒素和炎癥反應(yīng)正?；?，從而促進(jìn)肝臟再生。eLO對(duì)對(duì)乙酰氨基酚所致肝衰竭的治療效果得到進(jìn)一步證實(shí)。此外，科研人員進(jìn)行了毒性和生物分布評(píng)估，證明eLO對(duì)動(dòng)物沒(méi)有不良影響，并且仍然是非致瘤性的。

其中，小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞：L-Wnt3a細(xì)胞系的體外培養(yǎng)，用到了Ausbian胎牛血清。

《Heliyon》

Quantitative proteomics assay reveals G protein-coupled receptor kinase 4-induced HepG2 cell growth inhibition

研究?jī)?nèi)容：

為了探討G蛋白偶聯(lián)受體激酶4 (GRK4)對(duì)HepG2細(xì)胞的生物學(xué)作用及其可能的生物學(xué)機(jī)制，科研人員用過(guò)表達(dá)grk4的慢病毒載體(OE)，和陰性對(duì)照慢病毒載體(NC)感染HepG2細(xì)胞，使用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8和流式細(xì)胞術(shù)(FCM)評(píng)估細(xì)胞增殖、周期和凋亡。利用定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分析比較OE細(xì)胞和NC細(xì)胞的蛋白譜和差異表達(dá)蛋白(DEPs)，并利用生物信息學(xué)分析和平行反應(yīng)監(jiān)測(cè)(PRM)技術(shù)研究其功能、表達(dá)和可能的機(jī)制。結(jié)果顯示：接受OE的HepG2細(xì)胞比接受NC的HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)更慢。流式細(xì)胞儀顯示，與NC細(xì)胞相比，OE細(xì)胞發(fā)生了s期周期阻滯，OE細(xì)胞和NC細(xì)胞均未發(fā)生凋亡。在定量蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定的7006個(gè)蛋白中，根據(jù)過(guò)濾參數(shù)檢測(cè)了403個(gè)DEPs，其中135個(gè)表達(dá)下調(diào)，268個(gè)表達(dá)上調(diào)。除了參與過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)信號(hào)通路外，DEPs還參與細(xì)胞增殖、周期和代謝的生物學(xué)過(guò)程。PRM驗(yàn)證了與PPAR通路相關(guān)的DEPs的表達(dá)。本研究表明，GRK4可阻止HepG2細(xì)胞增殖，使細(xì)胞周期阻滯在s期，而PPAR通路通過(guò)GRK4參與HepG2細(xì)胞的調(diào)控。

其中，人胚腎細(xì)胞HEK293T和肝癌細(xì)胞HepG2的體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，用到了Ausbian血清系列產(chǎn)品。

《Inflammation》

Specific Knockdown of the NDUFS4 Gene Reveals Important Roles of Ferroptosis in UVB-induced Photoaging

研究?jī)?nèi)容：

紫外線(UV)照射顯著地促進(jìn)光老化。研究發(fā)現(xiàn)的鐵依賴性細(xì)胞死亡模式鐵凋亡在UVB誘導(dǎo)的皮膚光老化中起關(guān)鍵作用。本研究探討了鐵下垂在這方面的功能和調(diào)節(jié)機(jī)制。以細(xì)胞內(nèi)鐵和活性氧(ROS)增加為特征，鐵下垂與線粒體功能和結(jié)構(gòu)有關(guān)。通過(guò)RNA測(cè)序，科研人員確定了與UVB介導(dǎo)的光老化有關(guān)的NADH:泛醌氧化還原酶亞基S4 (NDUFS4)基因，并通過(guò)敲低NDUFS4來(lái)探索其在鐵死亡中的作用。在體外，抑制NDUFS4可降低鐵下垂，降低ROS和基質(zhì)金屬肽酶1水平，增加I型膠原α 1鏈、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4 (GPX4)、鐵蛋白重鏈1和溶質(zhì)載體家族7成員11水平，提示鐵下垂保護(hù)機(jī)制增強(qiáng)。此外，NDUFS4通過(guò)絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)途徑調(diào)控鐵下垂，其敲低可降低p38和ERK磷酸化，提高GPX4水平，增強(qiáng)鐵下垂抗性。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)支持這些發(fā)現(xiàn)，表明Ferrostatin-1，一種鐵下垂抑制劑，顯著減輕uvb誘導(dǎo)的皮膚光老化和相關(guān)蛋白的表達(dá)。這項(xiàng)研究揭示了NDUFS4在調(diào)控鐵凋亡中的新作用，并為鐵凋亡介導(dǎo)的uvb誘導(dǎo)的皮膚光老化提供了新的見解。

其中，對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞BJ Cell的體外培養(yǎng)，用到了Ausbian胎牛血清。